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產品簡介
A5480L1100 Hoechst 33258 *超級純*是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低,在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。Hoechst 33258為特異性DNA染料,與A-T鍵結合,這種染料對死細胞或經70%冷乙醇固定的細胞可立即染色。而活細胞的著色是漸進性的,在10min內可達飽和。
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC12L011/AC12L012/AC12L013 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 5 mL(20mM) | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | Hoechst 33258常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀 | 應用領域 | 生物產業 |
產品描述
Hoechst 33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低,在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。Hoechst 33258為特異性DNA染料,與A-T鍵結合,這種染料對死細胞或經70%冷乙醇固定的細胞可立即染色。而活細胞的著色是漸進性的,在10 min內可達飽和。在熒光顯微鏡下,活細胞核呈彌散均勻熒光,出現細胞凋亡時,細胞核或細胞質內可見濃染致密的顆粒塊狀熒光。Hoechst 33258常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測,也可以用于普通的細胞核和線粒體的顯像觀察。
Hoechst經常用來代替其它核酸染料如DAPI,這兩種染料關鍵的不同點在于,與DAPI相比,Hoechst 33258具有更強的親脂性,因此能更好的透過完整的細胞膜。用于細胞核染色時,推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5~10 μg/mL。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
Hoechst 33258 * 超級純* | AC12L011 | 5 mL |
Hoechst 33258 *超級純* | AC12L012 | 100 mg |
Hoechst 33258 *超級純* | AC12L013 | 1 g |
運輸與保存
藍冰運輸。-20℃干燥避光保存,有效期12個月。
產品參數
光學性質: | Ex(nm):352 | Em(nm):461 | |
化學參數: | 分子量:533.88 | 溶劑:Water | CAS:23491-45-4 |
使用方法
1. 緩沖液制備:用PBS或合適的緩沖液制備10~50μM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的細胞或組織染色:
對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。依次按步驟進行免疫熒光染色,和Hoechst 33258染色。如果不進行免疫熒光染色,則直接按步驟進行Hoechst 33258染色。
(1) 對于貼壁細胞或組織切片:加入適量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞:至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3~5 min。
(2) 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2~3次,每次3~5 min。
(3) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350 nm,發射波長460 nm。
3. 活細胞或組織染色:
(1) 細胞培養物中加入適量Hoechst 33258染色液,約1/10細胞培養基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液,對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。
(2) 在37℃培養細胞10~20 min。
(3) 用PBS或合適的緩沖液洗細胞2次。
(4) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350 nm,發射波長460 nm。
注意事項
1. 本產品科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。
2. 本產品溶于水,溶解度可達20 mM(約10mg/mL),也可直接購買5 mL(20 mM)的液體規格產品(貨號:AC12L011)。
3. 本產品對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
4. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。
5. 為減緩熒光淬滅可以使用李記生物的抗熒光淬滅封片劑(貨號:AC28L532)。
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